分離各種細(xì)胞器的方法有哪些

細(xì)胞器的分離，一般采用差速離心法，此法是利用細(xì)胞各組分質(zhì)量大小不同，在離心管不同區(qū)域沉降的原理，分離出所需組分，分離得到的細(xì)胞器，其純度可采用電子顯微鏡法、免疫學(xué)法或測(cè)定標(biāo)志酶活力法進(jìn)行鑒定。(文章內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考)

1、分離各種細(xì)胞器常用的方法是差速離心法。在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級(jí)離心，用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為：核、線粒體、溶酶體與過(guò)氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、最后為核蛋白體。

由于各種細(xì)胞器在大小和密度上相互重疊，而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中，一般重復(fù)2～3次效果會(huì)好一些。

差速離心只用于分離大小懸殊的細(xì)胞，更多用于分離細(xì)胞器。通過(guò)差速離心可將細(xì)胞器初步分離，常需進(jìn)一步通過(guò)密度梯離心再行分離純化。

2、密度梯度離心，用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部，通過(guò)重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心常用的介質(zhì)為氯化銫，蔗糖和多聚蔗糖。

線粒體，是細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸的主要場(chǎng)所，具有雙層膜，線粒體又被稱為‘動(dòng)力車間’因?yàn)榧?xì)胞生命活動(dòng)所需要的能力95%都是來(lái)自線粒體。

葉綠體，是綠色植物葉肉細(xì)胞中進(jìn)行光合作用的細(xì)胞器。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是由膜連接而成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，單層膜，是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”�？煞譃榛�面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工蛋白，滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成脂質(zhì)。真核動(dòng)植物細(xì)胞中都含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。

核糖體，無(wú)膜結(jié)構(gòu)，分為附著核糖體和游離核糖體，將氨基酸合成蛋白質(zhì)是由rRNA和核糖核蛋白構(gòu)成的微小顆粒，是合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所，所有細(xì)胞都含有核糖體。

高爾基體，與細(xì)胞分泌物的形成有關(guān)，主要是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工和轉(zhuǎn)運(yùn)，植物細(xì)胞分裂時(shí)，高爾基體與細(xì)胞壁的形成有關(guān)。

中心體是細(xì)胞中一種重要的無(wú)膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，存在于動(dòng)物及低等植物細(xì)胞中。每個(gè)中心體主要含有兩個(gè)中心粒。它是細(xì)胞分裂時(shí)內(nèi)部活動(dòng)的中心。

溶酶體，溶酶體是由高爾基體斷裂產(chǎn)生，單層膜包裹的小泡，數(shù)目可多可少，大小也不等，含有60多種能夠水解多糖，磷脂，核酸和蛋白質(zhì)的酸性酶，這些酶有的是水溶性的，有的則結(jié)合在膜上。